Istraživanje i razvoj

Stranice posvećene istraživanju lako mogu stvoriti dojam ozbiljnosti.

Dovoljno je dodati vremensku crtu, nekoliko fotografija iz laboratorija i daleki cilj koji se naziva „oživljavanje”. Organizacija tada odjednom djeluje znanstveno, čak i ako ništa od toga ne utječe na stvarni ishod za pacijenta.

Smatramo da kriteriji trebaju biti stroži.

Istraživanje u Tomorrow.bio mora imati jedan od dva cilja: poboljšati postupak koji već provodimo ili ukloniti neku od stvarnih prepreka između krioprezervacije i mogućeg budućeg oživljavanja.

Ponekad je rezultat nova oprema u sanitetskom vozilu. Ponekad je riječ o mjerenju koje pokazuje gdje su još postojali problemi u postupku. A ponekad je riječ o dugoročnom projektu koji do primjene na pacijentu može trebati i nekoliko godina.

Sve su to legitimni oblici napretka. No takvi rezultati ne opravdavaju istu razinu tvrdnji.

Sljedeći pacijent na prvom mjestu

Krioprezervacija čovjeka ne odvija se u kontroliranim laboratorijskim uvjetima ni u unaprijed pogodnom trenutku.

Počinje ondje gdje se član zatekne u trenutku smrti. Ekipa se može suočiti sa skučenim prostorom, otežanim venskim pristupom, odgođenim utvrđivanjem smrti ili višesatnim prijevozom prije sljedeće faze postupka.

Zato u istraživanju i razvoju najprije postavljamo praktično pitanje: što sljedeći postupak može učiniti bržim, ujednačenijim i lakšim za pravilnu provedbu?

Zato velik dio najkorisnijeg razvojnog rada u Tomorrow.bio uopće nije osobito futurističan.

Izradili smo lutke za kiruršku obuku s realističnom unutarnjom anatomijom, kadu s ledom prilagođenu našim sanitetskim vozilima te masku za hlađenje koja raspršuje hladnu vodu po glavi, a ekipi pritom omogućuje pristup području rada.

Time rješavamo sasvim praktične probleme. Obuka mora biti ponovljiva. Oprema mora odgovarati uvjetima u stvarnom vozilu. Hlađenje mora početi brzo, a da pritom ne ometa rad ekipe.

Takva su inženjerska rješenja manje privlačna od priče o mogućem preokretanju učinaka krioprezervacije. No upravo ona već danas mogu poboljšati kvalitetu očuvanja tkiva.

Isto vrijedi za kanulaciju, perfuziju i hlađenje na mjestu intervencije. Objavljeni plan Tomorrow.bio za 2026. uključuje ispitivanja bržih tehnika pristupa, uključujući višetočkovnu kanulaciju i ranije ispiranje femoralnim pristupom dok početna stabilizacija još traje.

Riječ je o ispitivanjima, ne o uobičajenoj praksi. Tehnika se u standardni protokol uvodi tek kada je ekipa može pouzdano primjenjivati i kada dokazi pokažu da dodatna složenost donosi stvarnu korist.

Ta razlika je važna. „Planiramo to isprobati” je iskrena izjava. Tvrdnja „to radimo” zahtijeva dokaz da se postupak doista provodi u praksi.

Cilj nije uvoditi novine radi novina. Cilj je skratiti razdoblje tople ishemije, ubrzati hlađenje i poboljšati primjenu krioprotektanta u uvjetima kakve nameću stvarni slučajevi.

Mjerimo jer uvjerenje nije isto što i podatak

Postupak se ne može ozbiljno unapređivati ako se svaki slučaj svodi na zaključak da je „ekipa učinila sve što je mogla”.

Naravno da je ekipa učinila sve što je mogla. No to nam gotovo ništa ne govori o rezultatu.

Tomorrow.bio za svakog pacijenta bilježi slijed događaja, temperature i podatke o postupku kako bismo ih mogli provjeriti, umjesto rekonstruirati prema sjećanju. S-MIX metrika pretvara vrijeme, temperaturu i metaboličku potporu u model izloženosti ishemiji.

Ta je metrika korisna jer šezdeset minuta na jednoj temperaturi nema isto biološko značenje kao šezdeset minuta na drugoj temperaturi. Ipak, riječ je o modelu, a ne o mikroskopskoj snimci niti o izravnom mjerenju očuvanosti sjećanja.

Nakon krioprotekcije i računalno kontroliranog hlađenja, Tomorrow.bio svakog pacijenta snima CT uređajem na temperaturi tekućeg dušika prije dugotrajnog skladištenja.

Standardizirana temperatura pri snimanju važna je za usporedbu nalaza. Slabljenje rendgenskih zraka ovisi o fizičkim uvjetima, pa snimanje pacijenata na istoj kriogenoj temperaturi omogućuje pouzdaniju procjenu raspodjele krioprotektanta te prepoznavanje područja s niskom koncentracijom krioprotektanta ili prisutnim ledom.

To je jedan od najvažnijih elemenata našeg sustava kontrole kvalitete. Ipak, takvo snimanje ne daje odgovor na sva pitanja.

CT ne razlučuje stanične membrane, sinapse ni finu građu za koju se vjeruje da nosi sjećanje i identitet. Vrlo dobra snimka važan je, ali ne i konačan dokaz očuvanosti ultrastrukture mozga.

Zato je Tomorrow.bio počeo uvoditi program provjere kvalitete na razini ultrastrukture. Uz pristanak člana, mali uzorci mozga i/ili leđne moždine mogu se pregledati elektronskim mikroskopom.

Cilj je procijeniti očuvanost struktura na razini koju CT ne može prikazati. Od kolovoza 2026. Tomorrow.bio javno je opisao ovaj rad, ali nije objavio rezultate elektronske mikroskopije pacijenata koji bi opravdali tvrdnju da je problem ultrastrukture riješen.

Tako se različiti izvori podataka trebaju nadopunjavati. S-MIX opisuje procijenjenu izloženost ishemiji. Podaci o postupku pokazuju kako su provedeni perfuzija i hlađenje. CT prikazuje raspodjelu gustoće u tijelu pacijenta. Elektronska mikroskopija omogućuje pregled odabranog tkiva na znatno finijoj razini.

Nijedan pojedinačni broj ne smije se predstavljati kao da mjeri sve.

Cijeli je pristup objašnjen u tekstu „Kako procjenjujemo kvalitetu očuvanja”.

Teži posao traje dulje

Bolji postupci na mjestu intervencije smanjuju oštećenje. Bolja mjerenja pokazuju što još nedostaje. Nijedno od toga, samo za sebe, ne daje reverzibilnu krioprezervaciju.

Taj dugoročniji razvojni put uključuje bolje krioprotektante, skladištenje uz manje toplinsko naprezanje, kontrolirano zagrijavanje, uklanjanje krioprotektanta, reperfuziju, popravak oštećenja i naposljetku obnovu biološke funkcije.

Svaki je od tih problema povezan s ostalima.

Učinkovitiji krioprotektant možda bolje sprječava stvaranje leda, ali može biti toksičniji. Brža primjena može ranije zaštititi tkivo, ali otežava praćenje tlaka i edema. Protokol koji izvrsno djeluje na organu u laboratorijskim uvjetima može dati drukčije rezultate nakon stvarnog razdoblja ishemije.

Zato se rad Tomorrow.bio na krioprotektantima usmjerava na uvjete stvarnih slučajeva, a ne samo na idealne laboratorijske okolnosti.

Objavljeni program za 2026. uključuje novu varijantu postojećeg krioprotektanta i moguće modifikatore krvno-moždane barijere s ciljem smanjenja dehidracije i skupljanja mozga tijekom perfuzije. To su razvojni ciljevi sve dok se ne dokumentiraju njihova primjena i rezultati.

Skladištenje otvara novi skup problema. Hlađenje vitrificiranog tkiva na minus 196 stupnjeva Celzijusa uzrokuje stezanje tkiva i može stvoriti dodatno termomehaničko naprezanje.

Cilj skladištenja na srednjoj temperaturi, poznatog kao ITS, jest održati pacijenta ispod područja staklastog prijelaza, bez hlađenja do temperature tekućeg dušika.

U kolovozu 2026. prvi ITS sustav projektiran za čovjeka stigao je u objekt EBF u Švicarskoj. Tomorrow.bio prva je organizacija za krioprezervaciju koja posjeduje sustav te vrste namijenjen toj veličini.

Sustav se ne koristi u rutinskim postupcima za pacijente.

Sustav je u višemjesečnoj fazi ispitivanja, tijekom koje se mjere stabilnost temperature, prostorna ravnomjernost, potrošnja dušika, ponašanje sustava upravljanja i mogući oblici kvara. Redoslijed je važan: sustav najprije treba preuzeti, opremiti senzorima, ispitati pri graničnim opterećenjima, utvrditi njegova ograničenja i tek potom odlučiti je li spreman za primjenu kod pacijenata.

Nakon pitanja skladištenja dolazi najteži dio.

Moguće buduće oživljavanje zahtijevalo bi ravnomjerno zagrijavanje velikih volumena bez pucanja tkiva i stvaranja leda. Krioprotektante bi trebalo ukloniti, ponovno uspostaviti krvotok i popraviti oštećenja bez izazivanja novog vala oštećenja.

Nijedna postojeća tehnologija to ne može učiniti za krioprezerviranog čovjeka. Ne postoji jamstvo da će takva tehnologija ikada postojati.

Plan razvoja Tomorrow.bio navodi zagrijavanje, reperfuziju, popravak i obnovu jer su to problemi koje treba riješiti. Samo navođenje tih problema ne znači da su riješeni.

Ipak, više cijenimo zahtjevan istraživački program koji polazi od stvarnih prepreka nego umirujuću priču koja preskače put od skladištenja do mogućeg buđenja.

Tehničke prepreke obrađene su u tekstovima „Izazovi reverzibilne krioprezervacije” i „Kako bi se oživljavanje jednog dana moglo postići”.

Plan razvoja treba pokazati što se promijenilo

U razgovorima s članovima stalno se ponavlja jedna tema: ljudi žele vidjeti konkretan rad.

Žele izvještaje o postupcima, rezultate kontrole kvalitete, informacije o napretku u EBF i iskren prikaz onoga što je još eksperimentalno. To je razumno očekivanje kada netko organizaciji povjerava odluku s dugoročnim posljedicama.

Tomorrow.bio objavljuje plan istraživanja i razvoja, godišnje prioritete, tehničke dokumente i izvještaje o slučajevima kako bi čitatelji mogli provjeriti navode koji nadilaze sama obećanja.

Izvještaji su važni jer se tek u stvarnim slučajevima vidi kako razvojna rješenja funkcioniraju u praksi. Krivulja hlađenja, nalaz CT snimanja ili zahtjevna perfuzija mogu otkriti slabost koju ni najbolji dijagram ne bi mogao pokazati.

Tada treba postaviti konkretna pitanja: što smo naučili, što smo promijenili u protokolu i jesu li ishodi u sljedećim slučajevima bili bolji?

Taj proces neće teći ravnomjerno. Neka ispitivanja neće uspjeti. Neke će ideje biti zamijenjene boljima. Negativan rezultat i dalje može biti vrijedan ako spriječi ponavljanje iste pogreške u radu s pacijentom.

Ipak, opći smjer razvoja mora ostati jasan.

Svaki sljedeći postupak trebao bi biti bolji od prethodnoga. Njegove rezultate treba objektivno mjeriti. Stečena saznanja treba primijeniti za poboljšanje sljedećeg postupka. Istodobno treba nastaviti rješavati veće probleme koji sprečavaju prijelaz od očuvanja do oživljavanja.

Upravo je to svrha istraživanja i razvoja u Tomorrow.bio.

Za dodatno čitanje

Primijenjeno inženjerstvo u Tomorrow.bio
Kako se procjenjuje kvaliteta očuvanja
Suvremeni sustav kriogenog skladištenja (ITS)
Kako bi se oživljavanje moglo postići